kraujo analizė

Imunofikacija: kas tai? Kodėl paleisti? G. Bertelli rezultatai

bendrumas

Imunofekcija yra laboratorinis tyrimas, leidžiantis identifikuoti ir įvesti biologiniame mėginyje esančius gama globulinus .

Išsamiai analizė leidžia ištirti paciento kraujo ar šlapimo imunoglobulinų (IgA, IgG, IgM, IgE arba IgD) ir lengvosios grandinės kappa arba lambda klases pagal jų specifinį elektroforezinį mobilumą., Vėliau, siekiant nustatyti, kuris gama globulinas yra įtrauktas, imunofikacija apima specifinių antigenų inokuliaciją fragmentui arba atitinkamam antikūnui ( anti-imunoglobulino antiserumui ): įtariamo pakeitimo buvimą patvirtina formavimasis nuosėdų, matomų plika akimi arba mikroskopu.

Ši informacija labai svarbi siekiant nustatyti, visų pirma, kraujo plazmos ląstelių ligų (gammopatijų ar plazmos ląstelių diskazijų) diagnozę. Imunofikacija yra labai naudinga daugybinės mielomos, Waldenström makroglobulinemijos ir pirminės amiloidozės (taip pat vadinamos lengvosios grandinės amiloidozės) vertinimu ir stebėjimu.

Imunofunkcija (arba imunoforezė, taip pat sutrumpinta kaip akronimas IFE ) yra būdas, kuriuo galima nustatyti, ar ir kokia imunoglobulinų (IgG, IgM, IgA, IgD, IgE) arba lengvosios grandinės kappa arba lambda klasė yra ir kokia yra. kraujo serume ir paciento šlapime.

Lengvosios grandinės kappa ir lambda apibūdina monokloninį komponentą, ty antikūnus, kurių cheminė struktūra yra tokia pati.

Sieric ir šlapimo imunofikacija: kada tai nurodoma?

Plazmazuliarinės diskazijos arba gammopatijos yra nevienalytė, nežinomos etiologijos sutrikimų grupė, kuriai būdingas:

  • B ląstelių klono proliferacija yra neproporcinga ;
  • Imunoglobulino (arba jo polipeptidų subvieneto) tipo ir (arba) šlapimo buvimas, struktūriškai ir elektroforetiškai homogeniškas ( monokloninis ).

Paprastai kraujo plazmos ląstelių diskazijos diagnozuojamos naudojant serumo ir šlapimo baltymų elektroforezę, po to imunofikacijos serume (IFE).

Tuo pačiu metu gali būti nustatytas kraujo tyrimas, kad būtų galima išmatuoti visą imunoglobulino koncentraciją (IgG + IgM + IgA).

Norėdami sužinoti daugiau: imunoglobulinai - kas jie yra, kaip jie matuoja ir vertina nuorodą »

Imunofikacija: pagrindinis principas

Imunofikacija yra dviejų fazių tyrimas (pirmiausia - elektroforezės agarozės gelis, po to imunosekipcija su specifiniais antiserumais ).

Pirmasis imunofikacijos etapas yra toks pat, kaip ir baltymų (arba protidogramos) ELEKTROFORESO, todėl būtina prisiminti tam tikrą sąvoką:

  • Elektroforezė - tai laboratorinė analizė, leidžianti nustatyti kraujo serume arba kituose biologiniuose mėginiuose esančių baltymų kiekį, ir kiekvienai frakcijai ji atskleidžia, ar yra kokių nors kokybės požymių. Ypač šis testas leidžia atskirti baltymus į penkias grupes: albuminą, alfa 1 globulinus, alfa 2 globulinus, beta globulinus ir gama globulinus ; pastarieji yra tiksliau tiriami imunofikacijos būdu.
  • Elektroforezė yra atskyrimo metodas, grindžiamas skirtingu elektriniu būdu įkrautų dalelių migracijos greičiu per tirpalą ir inertinę atraminę terpę, veikiant elektros srovei, generuojamai tiesioginės srovės. Praktikoje bandymas naudoja elektrinį krūvį ir paciento mėginyje esančių baltymų molekulinę masę . Pagal elektrinio lauko impulsą, šios makromolekulės migruoja ir "grupė" pagal tipą, reaguoja į stresą būdingu būdu. Rezultatas ( elektroforezinis modelis ) susideda iš įvairių smailių ir kreivių, į kurias atitinka baltymų frakcijos. Paprastai pirmasis smailė, aukštesnė ir siauresnė, yra albumino smailė; sekti, stebimi globulinų smailės, daug mažesnės už albuminą. Trasoje susidarančių smailių amplitudės ir intensyvumo padidėjimas arba sumažėjimas rodo didesnę arba mažesnę kiekvienos kategorijos baltymų buvimą; kuo daugiau baltymų yra juostoje, tuo didesnė atitinkama smailė. Gama globulinų atveju, jei norite sužinoti kiekvienos skirtingos klasės (IgA, IgM, IgG ir kt.) Kiekį, jums reikės pasinaudoti vienkartine doze. Apskritai, tuo daugiau juostos yra gamma-globulinai, tuo didesnis atitinkamas smailė; aukštis atitinka bendrą tam tikros kategorijos baltymų kiekį.
Išsiaiškinti detales: elektroforezė „Seroproote“ - kas tai yra, indikacijos ir rezultatai »

IMMUNOFISSAZIONE numato:

1) Agarozės gelio elektroforezė : paciento mėginys (serumas arba šlapimas) nusėdamas ant elektroforezės juostos, ty migracijos laikiklio (paprastai agarozės gelio). Taikant elektrinį lauką, generuojamą nuolatinės srovės, gaunamas skirtingų juostų atskyrimas. Praktiškai kiekvienas mišinyje esantis gama globulino tipas (tai yra paciento mėginyje) migruoja pagal molekulinę masę ir elektrinį krūvį. Skirtingas elektromagnetinis gama globulinų judumas leidžia juos identifikuoti (kiekvienas iš jų sutampa su konkrečia elektroforezės kelio juosta) ir stebėti bet kokias anomalijas.

2) Imunoprecipitacija su specifiniais antikūnais (fiksavimas) : kiekvienam elektroforezės juostai atskirai pridedami konkretiems antikūnams arba fragmentui (anti-IgG, anti-IgA, anti-IgM, anti-light kappa arba anti-grandinė ) būdingi antigenai. lambda lengva grandinė). Jei yra monokloninis baltymas, antigeno sąveika su atitinkamu antikūnu sukurs siaurą juostą (tai reiškia, kad rezultatas yra teigiamas) ir nuosėdų susidarymas, matomas plika akimi arba mikroskopu. Galiausiai, mėginys yra apdorojamas (t.y. nuplaunamas ir dažomas), kad būtų pašalinti baltymai, kurie nėra nusodinti, siekiant gauti gelio džiovinimą ir toliau skaityti rezultatus.

Kodėl taip

Kas yra imunofikacija?

Serumo imunofikacija yra bandymas, skirtas diagnozuoti ar stebėti ligas, kurioms būdingas gama globulino pakeitimas, ypač kai jis susijęs su monokloninio komponento ( monokloninės gammopatijos ) gamyba.

Daugiau sužinoti: monokloninės gammopatijos - kas ir ką jie yra »

Imunofekcija yra naudinga, jei įtariama plazmazuliarinė diskazija ir yra būtina MIELOMA (ir susijusių ligų) bei MGUS („neaiškios reikšmės monokloninės gammapatijos“ akronimas) tyrimui .

Šis tyrimas taip pat leidžia įvertinti Waldenström makroglobulinemiją ir lengvosios grandinės amiloidozę ( AL ).

Imunofekcija: kada yra paskirtas egzaminas?

Imunofikacijos indikacija yra po klinikinių arba laboratorinių tyrimų, kurie kelia įtarimų dėl monokloninių antikūnų arba imunoglobulinų pokyčių serume ar šlapime.

Pavyzdžiui, šis bandymas leidžia gilinti elektroforezės ar serologinio elektroforezės rezultatą: kai elektroforezės keliu juostos, atitinkančios gama globulinus, nukrypsta nuo normalumo, imunofikacija identifikuoja, kuris iš šių baltymų yra pakeistas kiekio atžvilgiu kokybę.

Apibendrinant galima teigti, kad imunofikacija serume gali būti:

  • Tuo atveju, kai kiti laboratoriniai tyrimai suteikia nenormalų rezultatą, nes nėra kraujo plazmos baltymų arba jie yra mažesni ir didesni nei įprastai;
  • Kai įtariame, kad yra ligų, kurios būdingos monokloninio komponento gamybai, pavyzdžiui:
    • Daugybinė mieloma ir jos variantai;
    • Waldenström makroglobulinemija;
    • amiloidozei;
  • Kai pacientui pasireiškia simptomų ir požymių, dėl kurių gali būti įtariama monokloninė gammopatija arba daugybinė mieloma, pavyzdžiui:
    • Kaulų skausmai;
    • anemija;
    • Lengvas nuovargis;
    • Pasikartojančios infekcijos;
    • Neaiškios lūžiai.

Daugybinės mielomos atveju baltymų elektroforezė ir imunofikacija taip pat yra labai naudingos ligos progreso stebėjimui (tolesniam tyrimui).

Imunofekcija: ant kurių gali būti imami mėginiai?

Biologiniai mėginiai, kurie gali būti imunofikuojami, daugiausia yra:

  • Serumas (imunofikacija serume);
  • Šlapimas (šlapimo imunofikacija);
  • Alkoholis * (skysčio imunofikacija).

* Pastaba : smegenų skystis arba skystis yra skystis, kuris užsikrečia ir apsaugo smegenis, nugaros smegenis, kaukolės nervus ir stuburo šaknis.

Normalios vertės

NEGATINIS monokloninių arba polikloninių gama globulinų serumo ir šlapimo imunofikacijos rezultatas laikomas normaliu .

„Globuline“ asortimentas

Gama globulinai sudaro 9-20% visų plazmos baltymų.

  • Referencinė vertė Gamma globulinai : 0, 9-1, 4 g / dl

Kalbant apie bendrą imunoglobulinų koncentraciją ( IgG + IgM + IgA ), manoma, kad vertės nuo 600 iki 2300 mg / dl yra normalios.

  • Imunogobulino koncentracija serume :
    • IgA : 90-400 mg / dl
    • IgG : 800-1800 mg / dl
    • IgM : 60-280 mg / dl
    • IgD : 0, 3-0, 4 mg / dl
    • IgE : 20-440 mg / dl

Pastaba : pamatinis tyrimo intervalas gali šiek tiek skirtis priklausomai nuo amžiaus, lyties ir prietaisų, naudojamų analizės laboratorijoje. Dėl šios priežasties pageidautina pasitarti su ataskaitoje tiesiogiai pateiktais intervalais. Taip pat reikia nepamiršti, kad analizės rezultatus turi vertinti visuotinis gydytojas, kuris žino paciento anamnezinį vaizdą.

Aukštos vertės - priežastys

Gama globulinų padidėjimas gali būti:

  • Polikloninis, jei imunoglobulinų gamyba yra nevienalytė, ty padidėjimą lemia visi globalinio diapazono komponentai, pagaminti arba gauti iš skirtingų plazmos ląstelių;
  • Monokloninis, kai gaminami arba gaunami gama globulinai iš vieno plazmos ląstelių tipo (klono).

Polikloninio globalinio diapazono padidėjimas gali būti susijęs su:

  • Lėtinės uždegiminės ligos;
  • Reumatoidinis artritas;
  • Sisteminė raudonoji vilkligė;
  • Lėtinės kepenų ligos (pvz., Hepatitas ir cirozė);
  • Ūminės ir lėtinės infekcijos;
  • Naujausi skiepai;
  • Kai kurios vėžio ligos.

Didelės monokloninės globulino gama vertės gali rodyti, kad yra:

  • Kai kurie navikai ir lėtiniai uždegimai;
  • Daugybinė mieloma;
  • limfoma;
  • Waldenström makroglobulinemija.

Gama globulino perteklius vadinamas hipergammaglobulinemija, o trūkumas yra žinomas kaip hipogammaglobulinemija .

Žemos vertės - priežastys

Gama globulinų kiekio sumažėjimas gali reikšti įvairių imuninės sistemos genetinių ligų, įskaitant agammaglobulinemiją, arba antrinio imunodeficito (pvz., AIDS, inkstų nepakankamumo, ūminio sepsio ir Kušingo sindromo) buvimą.

Gama globulino verčių sumažėjimas taip pat gali priklausyti nuo citostatinių vaistų, imunosupresantų ir steroidų suvartojimo.

Kaip atlikti

Sieric Immunofixation

Serumo imunofikacija apima paprastą kraujo piešimą iš rankos venų. Serumas gaunamas centrifuguojant biologinį mėginį; tai leidžia faktiškai atskirti ląsteles (korpusinę dalį) turinčią frakciją nuo skystos kraujo dalies (plazmos). Kraujo serume nėra krešėjimo faktorių (fibrinogeno, VIII faktoriaus, faktoriaus V ir protrombino).

Šlapimo imunofikacija

Norint atlikti šlapimo imunofikaciją, būtina surinkti nedidelį kiekį šlapimo specialiame steriliame inde. Pasak gydytojo ir laboratorinių indikacijų, mėginys gali būti surinktas be tikslaus laiko ( atsitiktinio ) arba per 24 valandas .

Alkoholio imunofikacija

Analizei reikalingas mažas cerebrospinalinio skysčio kiekis, įkišant adatą į stuburo ertmę ( juosmens punkcija ).

paruošimas

Imunofikacija: kaip pasirengti egzaminui?

  • Prieš imant kraują, kai kurioms laboratorijoms gali prireikti bent 10-12 valandų nevalgius. Per šį laikotarpį leidžiama vartoti nedidelį kiekį vandens.
  • Imunofikaciją galima atlikti su šlapimu, surinktu tam tikru paros metu (atsitiktiniu būdu) arba per 24 valandas, todėl būtina iš anksto gauti atitinkamus sterilius indus.
  • Tačiau dėl skysčio imunofikacijos specialaus paruošimo nereikia.

Kas gali pakeisti egzamino rezultatus?

Kai kurie vaistai gali turėti įtakos imunofikacijos rezultatams, todėl patartina pranešti gydytojui apie bet kokius farmakologinius gydymo būdus.

Per šešis mėnesius prieš tyrimą vakcinų (imunizacijos) ir vaistų, pvz., Fenitoino, prokainamido, geriamųjų kontraceptikų, metadono ir terapinių gamma-globulinų, vartojimas gali padidinti imunoglobulinų koncentraciją. Kiti vaistai, galintys pakeisti bandymo rezultatus, yra kortikosteroidai, neomicinas, acetilsalicilo rūgštis ir chlorpromazinas.

Rezultatų aiškinimas

Imunofikacijos rezultatas vertinamas kartu su kitų tyrimų rezultatais. Šių duomenų aiškinimas priklauso bendrosios praktikos gydytojui arba referentui, kuris gali nustatyti ir pranešti apie konkrečių gama globulino pokyčius (pvz., Juostą, kuri sutampa su imunoglobulinais G) tam tikroms ligoms. Šis vertinimas patvirtina arba palaiko diagnostinę hipotezę: apskritai imunofikacija gali atskleisti normalų gama globulino profilį arba nustatyti monokloninį baltymą arba polikloninį modelį .

Nustačius ligą, imunofikaciją galima atlikti:

  • Laikui bėgant stebėkite ligą ir sekite kursą (tolesni veiksmai);
  • Patikrinkite terapinio protokolo veiksmingumą .

Privalumai ir trūkumai imunofikacijos

Palyginti su baltymų elektroforeze, imunofikacija:

  • Tai greitesnis : imunofikacijos rezultatai paprastai gaunami per tris valandas;
  • Jis yra jautresnis (nors ir šiek tiek): imunofikacija gali atskleisti imunoglobuliną, neįtrauktą į baltymų elektroforezę, ypač esant mažoms koncentracijoms (mažiau nei 1 g / l).

Be to, imunofikacija:

  • Jis gali būti iš dalies automatizuotas ;
  • Jis yra lengvai skaitomas ir interpretuojamas .

Tačiau imunofikacija yra brangesnė už baltymų elektroforezę ir leidžia tik gama globulino analizę .

Normalus rezultatas

Imunofikacijoje įprastas kelias apima:

  • Juosta, kuri sutampa su tamsesniu imunoglobulinu G ( IgG );
  • Juosta, atitinkanti lengvesnį imunoglobuliną A ( IgA );
  • Imunoglobulino M ( IgM ) juostos nebuvimas;
  • Kappa juosta yra tankesnė nei lambda (lengvoji grandinė), santykiu 2: 1.

Normaliomis rezultatais juostos yra didelės ir palaipsniui ir vienodai sumažėja spalvos tankis, nukreiptas į imunoelektroforezės juostos kraštus.

Polikloniniai gama globulinai

Kai kuriais atvejais visos imunofikacijos juostos yra vienodai užsidengtos vienodai. Šis modelis rodo polikloninių imunoglobulinų buvimą. Be to, šiuo atveju juostos yra didelės ir perėjimas prie imunoforetinės juostos kraštų yra laipsniškas. IgM juosta - paprastai nėra - yra plati.

Monokloniniai gama globulinai

Kai imunofikacijos kelyje galima nustatyti siaurą juostą su aštriais kraštais, tai reiškia, kad monokloninių komponentų paieška yra teigiama .

Monokloninio imunoglobulino identifikavimas yra naudingas diagnozuojant šias sąlygas:

  • Nenustatytos reikšmės monokloninė gammopatija (MGUS);
  • Daugybinė mieloma;
  • Waldenstrom makroglobulinemija;
  • Amiloidozei.

Be to, imunofikaciją galima naudoti kraujo plazmos ląstelių diskazijų (ty daugybinės mielomos ir Waldenstrom makroglobulinemijos) gydymui stebėti . Jei po chemoterapijos monokloninio baltymo kiekis sumažėja arba jo nėra, tai gali reikšti atsaką į gydymą . Priešingai, nuolatinis monokloninis baltymas, nepaisant gydymo, yra priešgaisrinės ligos požymis .

Pastaba . Neigiamas rezultatas imunofiksuojant ne visada atmeta plazmazuliozę. Pavyzdžiui, daugybinė ne sekreto ar oligosekretorinė daugybinė mieloma gali sukelti neigiamą rezultatą tiek šlapime, tiek serume. Todėl, jei diagnostinis įtarimas dėl gammopatijos vis dar yra didelis, nurodomas šviesos Kappa / Lambda Libere grandinių santykis ( K / L santykis ).

Daugialypės sklerozės imunofikacija ir diagnostika

Cerebrospinalinio skysčio (CSF) imunofikacija nustatoma, kai gydytojas įtaria išsėtinę sklerozę . Šiuo atveju nustatomas pėdsakas yra būdingas, nes jis pabrėžia vadinamųjų oligokloninių juostų buvimą. Tyrimo rezultatas yra teigiamas . Turėtų būti laikoma, kad dažnių juostos paprastai nėra stebimos imunofikacijos serume metu, nes jos koreliuoja su intratekalinio gama globulino gamyba .

Tačiau reikia pažymėti, kad ši išvada nebūtinai patvirtina diagnozę, nes gali atsirasti kitų ligų su oligokloninėmis juostomis smegenų skystyje.

Kitaip tariant, oligokloninių juostų identifikavimas su skysčio imunofikacija yra labai naudingas daugkartinės sklerozės diagnozei paremti, tačiau turi būti patvirtintas kitais tyrimais . Kitos sąlygos, kurios gali sukelti tokius rezultatus, yra centrinės nervų sistemos uždegimas, įskaitant: su ŽIV susijusį encefalitą, neurosifilį, neurosarkoidozę, Laimo meningoencefalitą, piktybinius CNS navikus, optinį neuromielitą ir skersinį mielitą.